Biokémia számolás (gélszűrés)?
Gélszűrő oszlopon következő elúciós térfogatokat kaptuk kalibráló globuláris fehérjékre:
β-amiláz: 200 kDa 9 ml
IgG: 150 kDa 10 ml
albumin: 66 kDa 14 ml
ovalbumin: 42 kDa17 ml
szénsav-anhidráz: 30 kDa 20 ml
Egy ismeretlen globuláris fehérje elúciós térfogata: 13.6 ml gélszűrő oszlopon.
Redukáló SDS-PA gélen kb. 15 és 23 kDa-nál ad sávot.
Nem redukáló gélen kb. 38 kDa-nál ad sávot.
Hány polipeptid láncból áll ez a fehérje? Mi az alegység-összetétele és a teljes tömege?
válasza:A fehérje a gélszűrő oszlopon kicsivel az albumin előtt jön le, szóval teljes tömege valamivel nagyobb, mint 66 kDa. Mivel a redukáló és a nem redukáló SDS gélen máshogy néz ki, vannak benne diszulfidhidak. 15+23=38, tehát egy 15 kDa és egy 23 kDa polipeptidláncból áll, amelyek diszulfidhíddal vannak összekötve. Viszont a GF oszlopon nem 38 kDa-nál jön le, szóval oligomert képez. 2x38=76 kDa, ez passzol a 13.6 ml-hez (kicsit nagyobb, mint 66 kDa), tehát egy dimerről van szó.
Összefoglalva a fehérje 4 polipeptid láncból áll, az össztömege 76 kDa.
Kapcsolódó kérdések:
Minden jog fenntartva © 2024, www.gyakorikerdesek.hu
GYIK | Szabályzat | Jogi nyilatkozat | Adatvédelem | Cookie beállítások | WebMinute Kft. | Facebook | Kapcsolat: info(kukac)gyakorikerdesek.hu
Ha kifogással szeretne élni valamely tartalommal kapcsolatban, kérjük jelezze e-mailes elérhetőségünkön!